YY/T 0953-2020 醫(yī)用羧甲基殼(ké)聚(jù)糖(táng)

範(fàn)圍
本標準(zhǔn)規定了(liǎo)醫(yī)用羧(suō)甲基(jī)殼(ké)聚糖原料的要(yào)求，試驗方(fāng)法(fǎ)，包裝，運(yùn)輸和(hé)貯存等(děng)。
本(běn)標準適(shì)用於(yú)以殼聚(jù)糖或(huò)甲 殼素為(wéi)原料(liào), 經(jīng)脫乙酰化，羧化(huà)，純(chún)化(huà)而成(chéng)的(dí)用於(yú)製造組織工程(chéng)醫(yī)療(liáo)器械產(chǎn)品的醫用羧(suō)甲(jiǎ)基(jī)殼(ké)聚(jù)糖。
注: 羧甲(jiǎ)基(jī)殼聚(jù)糖(táng)作(zuò)為其(qí)他醫(yī)療器(qì)械(xiè)產(chǎn)品的(dí)原料(liào)使(shǐ)用時(shí)可以(yǐ)參考該(gāi)標準(zhǔn)。

術(shù)語(yǔ)和定(dìng)義
下列(liè)術語(yǔ)和(hé)定義適用(yòng)於本文(wén)件。
殼聚糖  chitosan
由(yóu)2-氨基-2-脫(tuō)氧(yǎng)-D-吡(pǐ)喃葡萄(táo)糖(táng)(GlcN)和(hé)2-乙酰氨基-2-脫氧-D-吡喃(nán)葡萄糖(táng)(GlcNAc)通過β(1→4)連(lián)接而(ér)成(chéng)的(dí)綫性聚多糖(táng)。其(qí)結構(gòu)式為:


甲殼素(sù)  chitin
幾(jī)丁質
甲殼(ké)質
化(huà)學(xué)名稱(chēng): β-(1,4)-2-乙酰氨(ān)基-2-脫氧-D-吡(pǐ)喃(nán)葡萄糖，為自(zì)然界的一(yī)種(zhǒng)半(bàn)透明(míng)而堅硬的材料，是(shì)真菌(jūn)的(dí)細胞壁(bì)和節肢(zhī)動物的外骨骼裏的(dí)主(zhǔ)要(yào)組成部(bù)分。
羧(suō)甲基甲殼(ké)素  carboxymethylchitin
甲(jiǎ)殼(ké)素(sù)的(dí)羥(qiǎng)基上的(dí)氫被(bèi)羧(suō)甲基取(qǔ)代(dài)後的產物。
羧甲基殼聚(jù)糖(táng)  carboxymethylchitosan
羧甲(jiǎ)基(jī)甲(jiǎ)殼(ké)素脫乙(yǐ)酰(xiān)化後(hòu)或(huò)殼聚糖(táng)的羥基(jī)/氨基(jī)上(shàng)的(dí)氫(qīng)被(bèi)羧甲基(jī)取代後(hòu)的(dí)產物。
殘留物  residues
在原(yuán)料中(zhōng)存在或(huò)材(cái)料加工過程中引(yǐn)入(或(huò)產(chǎn)生)的(dí)可能對人(rén)體產生(shēng)一定副作用(yòng)的(dí)需(xū)要(yào)去除而(ér)可能在(zài)最(zuì)終產品中仍然(rán)會(huì)殘留的某種(zhǒng)(些)物質。
降(jiàng)解  degradation
環(huán)境條(tiáo)件(jiàn)下(xià)引起的材(cái)料(liào)的(dí)化學(xué)鍵斷裂，導致機械性(xìng)能(néng)和/或(huò)化(huà)學完(wán)整性(xìng)降(jiàng)低。
體外(wài)降解  degradationinvitro
貯存於(yú)生理液中或模擬環(huán)境中(zhōng)所(suǒ)引 起(qǐ)的(dí)降(jiàng)解。

動物(wù)源性材料要(yào)求
動物源(yuán)性(xìng)初始原料，應(yīng)按(àn) YY/T 0771.1，YY/T 0771.2 和(hé) YY/T 0771.3 的(dí)要求進(jìn)行(háng)管(guǎn)理和控製(zhì)。

技術要(yào)求
外(wài)觀
羧甲(jiǎ)基(jī)殼聚糖應(yīng)為白(bái)色或淡(dàn)黃色固(gù)體，無(wú)肉(ròu)眼可(kě)見(jiàn)異(yì)物(wù)。
鑒(jiàn)別
羧(suō)甲(jiǎ)基(jī)殼聚(jù)糖的(dí)傅裏葉(yè)變(biàn)換紅外光(guāng)譜(FT-IR)，在3250cm^-1~3450cm^-1(寬(kuān)峰)，2910cm^-1~2950cm^-1，1600cm^-1(或1654cm^-1和1550cm^-1)，1380cm^-1(或1410cm^-1和1323cm^-1)有羧(suō)甲基殼聚(jù)糖特征(zhēng)吸收(shōu)峰(fēng)。 除了(liǎo)3250cm^-1~3450cm^-1和(hé)2910cm^-1~2950cm^-1波(bō)數處(chǔ)的吸收峰外，其他特(tè)征吸(xī)收(shōu)峰實測(cè)值(zhí)的波數誤(wù)差(chà)應(yīng)小於(yú)規定值的0.5%。
注: 羧(suō)甲(jiǎ)基殼(ké)聚糖參考紅外(wài)圖譜參(cān)見附錄(lù)A。
取代度(dù)(羧(suō)化度)
羧(suō)甲基殼(ké)聚糖(táng)的取(qǔ)代度(dù)應(yīng)大於(yú)80%。
脫乙酰度
羧(suō)甲基殼聚糖(táng)的脫乙(yǐ)酰度應(yīng)符合標(biāo)示值。
等(děng)電(diàn)點
羧(suō)甲(jiǎ)基殼(ké)聚糖的等電(diàn)點(diǎn)應(yīng)符合標示(shì)值。
幹燥(zào)失(shī)重(zhòng)
羧甲(jiǎ)基(jī)殼聚糖的(dí)幹燥(zào)失重應(yīng)不大(dà)於15%(質(zhì)量分數(shù))。
pH值
羧(suō)甲基殼(ké)聚糖檢(jiǎn)驗液(yè)的pH值(zhí)應在(zài)6.0~8.0之(zhī)間。
羧甲基(jī)殼(ké)聚糖(táng)如(rú)果(guǒ)主要以鈉(nà)鹽形式(shì)存在，其檢驗(yàn)液的pH值(zhí)應符合標示值。
透(tòu)光率(shuài)
羧(suō)甲基(jī)殼(ké)聚糖(táng)檢驗(yàn)液(yè)在(zài)波長660nm處透光率應(yīng)不(bù)小於(yú)98.0%。
重(zhòng)均(jūn)分(fēn)子(zǐ)質(zhì)量(liáng)及(jí)分(fēn)子質(zhì)量(liáng)分(fēn)布(bù)
應確定羧(suō)甲 基殼聚糖(táng)的(dí)重均分子質量(liáng)和(hé)允(yǔn)差範(fàn)圍，分子(zǐ)質量分(fēn)布係(xì)數應在1.0~3.0範圍內。
紫(zǐ)外(wài)吸(xī)光度
羧甲基殼(ké)聚糖檢驗液在260nm和280nm波長(cháng)處的(dí)吸光(guāng)度(dù)均(jūn)不大(dà)於(yú)0.1。
羧甲基(jī)殼聚糖含量
羧甲(jiǎ)基殼(ké)聚(jù)糖含量(liáng)應不(bù)小於85%(質量分數)。
蛋白質含(hán)量
羧(suō)甲(jiǎ)基殼聚(jù)糖(táng)蛋(dàn)白(bái)質含量(liáng)應不大於0.2%(質(zhì)量(liáng)分(fēn)數(shù))。
重金屬和(hé)微量(liáng)元素
羧(suō)甲基殼(ké)聚(jù)糖重金(jīn)屬總量(以(yǐ)Pb²⁺計，鐵元素(sù)除(chú)外(wài))應(yīng)不(bù)大於10μg/g。
總砷(shēn)含(hán)量不大於4μg/g，汞含量不大於4μg/g，鐵(tiě)含量不大(dà)於(yú)50μg/g。
熾灼殘渣(zhā)
羧(suō)甲基(jī)殼聚(jù)糖熾(chì)灼殘渣(zhā)應符合標示(shì)值。
不溶(róng)物(wù)
羧(suō)甲(jiǎ)基殼(ké)聚糖(táng)中不溶(róng)物應不大(dà)於0.5%(質(zhì)量(liáng)分數，以(yǐ)幹燥品(pǐn)計)。
殘留(liú)物
乙醇(chún)殘留(liú)量
羧甲基(jī)殼聚糖(táng)中(zhōng)乙(yǐ)醇殘(cán)留量應不大於(yú)0.5%(質量(liáng)分數(shù))。
二甘醇(chún)酸殘(cán)留量
羧(suō)甲(jiǎ)基(jī)殼聚糖中二甘醇(chún)酸(suān)殘留量應不大於0.1%(質量分數)。
其他殘(cán)留物
若產品(pǐn)含有(yǒu)《中華(huá)人民共和(hé)國藥典(2015年(nián)版四部(bù))》0861殘留溶(róng)劑測(cè)定法(fǎ)附(fù)表1中一(yī)，二類溶劑(jì)，以及經確(què)證(zhèng)含有的其他(tā)有(yǒu)害殘留物，應(yīng)按 GB/T 16886.17 要求(qiú)給出許可量(liáng)。
無菌或(huò)微生(shēng)物限(xiàn)度(dù)
若(ruò)原(yuán)料(liào)標(biāo)示為“無(wú)菌(jūn)"，應通(tōng)過(guò)無菌檢查，或者通過(guò)生(shēng)產者(zhě)的(dí)文(wén)件驗證是(shì)否符合(hé)無(wú)菌規(guī)定(dìng)。
若原料(liào)為(wéi)非無菌(jūn)，需氧菌總(zǒng)數(shù)應小(xiǎo)於100CFU/g，黴菌和酵(jiào)母菌菌落(là)數(shù)應(yīng)小於10CFU/g，不(bù)得檢出(chū)金黃色葡萄球(qiú)菌(jūn)，銅(tóng)綠(lǜ)假(jiǎ)單胞菌和(hé)大(dà)腸(cháng)埃希菌(jūn)。
細菌內(nèi)毒素
若(ruò)原料標示(shì)為(wéi)“無(wú)菌"，細菌內毒素應(yīng)小於0.05EU/mg。
生(shēng)物學評(píng)價(jià)
應按照(zhào) GB/T 16886.1 的(dí)要(yào)求(qiú)進行(háng)生物(wù)學評價(jià)。

試驗(yàn)方法
取代(dài)度(dù)(羧化度(dù))
按照附錄B規定的方(fāng)法測(cè)定，應符合(hé)"取(qǔ)代(dài)度(羧化(huà)度)"規定(dìng)。
脫乙(yǐ)酰度(dù)
按(àn)照附錄B規(guī)定(dìng)的方(fāng)法測(cè)定(dìng)，應符合"脫(tuō)乙(yǐ)酰(xiān)度"規(guī)定。

附錄B  (規範(fàn)性附錄(lù))
羧(suō)甲基殼聚(jù)糖(táng)脫乙酰度和(hé)取(qǔ)代度測定(dìng)

原理
取代度為(wéi)試(shì)樣中(zhōng)羧甲(jiǎ) 基(jī)的總(zǒng)摩爾數(shù)占(zhān)試樣中(zhōng)總(zǒng)的(dí)氨(ān)基(jī)糖單元摩(mó)爾數(shù)的百分數，脫乙(yǐ)酰(xiān)度(dù)為試樣中脫(tuō)乙(yǐ)酰基(jī)的(dí)氨(ān)基糖單元摩(mó)爾數占試樣(yàng)中總(zǒng)的(dí)氨(ān)基糖(táng)單元摩(mó)爾數(shù)的(dí)百(bǎi)分(fēn)數(shù)。
將試樣溶(róng)於(yú)鹽酸(suān)溶液，用*標準溶(róng)液將(jiāng)已知量(liáng)的(dí)酸式羧(suō)甲基殼聚糖(táng)重(zhòng)新(xīn)滴定(dìng)成(chéng)鈉(nà)鹽，滴(dī)定(dìng)曲綫中先後出(chū)現第(dì)一(yī)拐(guǎi)點(過(guò)剩鹽(yán)酸滴(dī)定終點)，第二拐(guǎi)點(diǎn)(羧基滴(dī)定終(zhōng)點(diǎn))，第(dì)三拐(guǎi)點(氨(ān)基滴定終點(diǎn))，可(kě)測(cè)得試(shì)樣(yàng)中羧(suō)基(jī)和(hé)氨(ān)基的含(hán)量(liáng)，從而計(jì)算出羧(suō)甲基殼(ké)聚糖(táng)的取代度(dù)和脫乙酰度。

設備(bèi)與(yǔ)試劑
分(fēn)析天平，滴(dī)定儀(yí)(或(huò)鹼(jiǎn)式滴定管(guǎn)，酸度(dù)計(jì)和恒(héng)溫磁(cí)力攪(jiǎo)拌器)，鹽酸(分析(xī)純及(jí)以(yǐ)上)和*滴(dī)定液(yè)。

實(shí)驗步驟(zhòu)
取0.1g羧(suō)甲基(jī)殼聚(jù)糖，精(jīng)密稱定，加入(rù)20mL 0.3mol/L鹽酸(suān)溶(róng)液(yè)溶(róng)解，用0.1mol/L*滴定液滴定(dìng)，記(jì)錄滴定(dìng)液消耗(hào)的體(tǐ)積(jī)與pH值(zhí)。 以(yǐ)滴定(dìng)液消耗的體積(jī)為橫坐標(biāo)，溶液(yè)的pH值為(wéi)縱(zòng)坐(zuò)標(biāo)作(zuò)圖(tú)，得(dé)到(dào)所(suǒ)測樣品的pH滴(dī)定(dìng)曲綫，或(huò)者以(yǐ)滴(dī)定液消耗(hào)的體(tǐ)積為(wéi)橫坐(zuò)標，ΔpH/ΔV_NaOH為縱坐標(biāo)作圖，得到一階曲綫。
注1: 可根(gēn)據(jù)具體情(qíng)況調整樣品的取(qǔ)樣量(liáng)，鹽酸(suān)溶液(yè)濃(nóng)度和(hé)體(tǐ)積(jī)。
注2: 如(rú)果在(zài)曲綫上無(wú)法確(què)定(dìng)突躍點，可通過(guò)觀察(chá)原(yuán)始(shǐ)滴定數據(jù)的變化值(zhí)並(bìng)結(jié)合pH值(zhí)範(fàn)圍來確定。

計算
羧(suō)甲(jiǎ)基(jī)殼(ké)聚糖取(qǔ)代度(dù)和(hé)脫乙酰(xiān)度(dù)分別按(àn)式(shì)(B.1)和(hé)式(B.2)計算。

式(shì)中(zhōng):
ω_DS ——樣品取代度，%；
ω_DD ——樣(yàng)品脫乙酰度，%；
203 ——N- 乙酰氨基(jī)-D-葡萄糖(táng)結構(gòu)單(dān)元相(xiāng)對分(fēn)子量；
ΔV₁ ——第(dì)一和(hé)第二突(tū)躍(yuè)點(diǎn)之間(jiān)消耗(hào)的(dí)NaOH滴(dī)定(dìng)液的體積(jī)之(zhī)差，單位為毫(háo)升(shēng)(mL)；
ΔV₂ ——第三和(hé)第(dì)二突躍(yuè)點(diǎn)之(zhī)間(jiān)消耗(hào)的NaOH滴(dī)定(dìng)液(yè)的體(tǐ)積(jī)之差(chà)，單位為毫(háo)升(mL)；
c₁  ——NaOH滴(dī)定(dìng)液(yè)的濃(nóng)度(dù)，單(dān)位為摩(mó)爾(ěr)每(měi)升(mol/L)；
m  ——樣品質量(liáng)，單(dān)位為(wéi)毫克(mg)；
ω₀ ——樣品的幹燥(zào)失重，%；
80 ——羧甲(jiǎ)基鈉的(dí)相(xiāng)對分(fēn)子質量(liáng)；
42 ——乙酰基的(dí)相對(duì)分子質量(liáng)。