GB/T 5510-2024 糧(liáng)油(yóu)檢(jiǎn)驗(yàn) 穀物(wù)及(jí)製(zhì)品脂肪酸(suān)值的(dí)測定

範(fàn)圍
本(běn)文(wén)件描述了(liǎo)測定(dìng)穀物及製(zhì)品(pǐn)中(zhōng)脂肪酸(suān)值手(shǒu)工(gōng)滴定(dìng)法，自動(dòng)電位滴定儀法，自動(dòng)光(guāng)度滴定儀(yí)法和(hé)自(zì)動圖(tú)像分析滴(dī)定(dìng)儀法四(sì)種方法。
本(běn)文件(jiàn)適用於稻穀(gǔ)等(děng)稻類(lèi)穀物及其碾(niǎn)磨製(zhì)品，小(xiǎo)麥(mài)等麥類(lèi)穀物(wù)及其碾(niǎn)磨製(zhì)品，玉(yù)米(mǐ)等(děng)粗(cū)糧(liáng)類(lèi)穀物及(jí)其碾(niǎn)磨製(zhì)品中脂(zhī)肪酸值的測(cè)定(dìng)。
本(běn)文件(jiàn)自(zì)動(dòng)光度(dù)滴(dī)定儀法和(hé)自(zì)動圖像分(fēn)析(xī)滴定(dìng)儀(yí)法不(bù)適用(yòng)於紅色(sè)，紫(zǐ)色(sè)，綠(lǜ)色，黑色等(děng)深顏(yán)色(sè)的穀物及(jí)其(qí)碾磨(mó)製品中脂(zhī)肪(fáng)酸(suān)值的測定。

術語和定義(yì)
本文(wén)件(jiàn)沒有需(xū)要界(jiè)定的(dí)術語和(hé)定義(yì)。

一般(bān)規(guī)定(dìng)
除非另有(yǒu)說明(míng)，本(běn)文(wén)件所用試劑(jì)均(jūn)為(wéi)分(fēn)析(xī)純，水(shuǐ)為 GB/T 6682 規(guī)定的三級水。
氫氧(yǎng)化鉀標(biāo)準儲備溶液(溶(róng)劑(jì)為水)在10℃~30℃條(tiáo)件(jiàn)下，密封(fēng)保存時間一般不超(chāo)過6個月，開封使(shǐ)用(yòng)過的(dí)保(bǎo)存時間(jiān)一(yī)般不超過(guò)2個月(yuè)(傾(qīng)出(chū)溶液後立即蓋(gài)緊(jǐn)瓶蓋(gài))；0.01mol/L氫氧(yǎng)化(huà)鉀(jiǎ)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶(róng)液(yè)的(dí)濃(nóng)度應在規(guī)定(dìng)濃度(dù)的±0.5%範圍(wéi)以內；0.01mol/L水(shuǐ)溶劑(jì)氫(qīng)氧化(huà)鉀標準滴(dī)定溶液在25℃以(yǐ)下條(tiáo)件保存時(shí)間(jiān)最(zuì)長不(bù)超過30d(傾(qīng)出溶液後(hòu)立即蓋緊(jǐn)瓶(píng)蓋)，當儲存條(tiáo)件不滿足要求(qiú)時，應(yīng)臨用現(xiàn)配(pèi)；0.01mol/L乙醇(chún)溶(róng)劑氫(qīng)氧化(huà)鉀標(biāo)準滴(dī)定溶液(yè)應(yīng)臨用現配；當需用(yòng)本文件規(guī)定(dìng)用(yòng)量以外的標(biāo)準滴(dī)定溶液時，可按(àn)照本文件(jiàn)規定的方法(fǎ)稀釋；在任(rèn)何情況(kuàng)下，當標(biāo)準(zhǔn)溶(róng)液出(chū)現(xiàn)渾濁，沉(chén)澱，顏色(sè)變(biàn)化(huà)等(děng)現象(xiàng)時，應(yīng)立(lì)即(jí)停(tíng)止(zhǐ)使用(yòng)，重新(xīn)配(pèi)製並(bìng)標(biāo)定(dìng)。
測(cè)定(dìng)過(guò)程的環(huán)境溫(wēn)度應控(kòng)製(zhì)在15℃~25℃。
樣(yàng)品(pǐn)碾(niǎn)磨完成後(hòu)，應盡(jìn)快用(yòng)提取(qǔ)液提(tí)取，碾磨(mó)好的(dí)樣品放(fàng)置時間不(bù)應超過(guò)2h；樣(yàng)品(pǐn)提取(qǔ)後(hòu)應及時(shí)滴(dī)定。若未(wèi)能及時(shí)滴(dī)定，應將(jiāng)分離(lí)後的(dí)提(tí)取液密閉放置於(yú)4℃冰箱(xiāng)冷藏(cáng)，放置(zhì)時(shí)間(jiān)不(bù)應(yīng)超(chāo)過24h。
水(shuǐ)分含(hán)量(liáng)在18%以上的糧(liáng)食(shí)應按照 GB/T 5497 兩次(cì)烘幹法進行預烘(hōng)幹後再進行碾(niǎn)磨。

手工滴(dī)定法
原理(lǐ)
在一(yī)定(dìng)溫(wēn)度條(tiáo)件下，用(yòng)無水乙醇提取樣品(pǐn)中的遊(yóu)離脂(zhī)肪酸，以(yǐ)百裏香酚藍(lán)溶液作指(zhǐ)示(shì)劑(jì)，用氫氧(yǎng)化(huà)鉀(jiǎ)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶(róng)液(yè)中和(hé)樣品溶液中(zhōng)的(dí)遊離脂(zhī)肪酸，以(yǐ)指示(shì)劑相應(yīng)的顏(yán)色(sè)變化判(pàn)定滴定終點，通(tōng)過滴定(dìng)消耗的(dí)標準溶液(yè)體(tǐ)積(jī)計(jì)算樣(yàng)品的(dí)脂肪酸值(zhí)。

自(zì)動電(diàn)位(wèi)滴定儀法
原理
在一(yī)定(dìng)溫度下，用無水(shuǐ)乙(yǐ)醇(chún)提取(qǔ)試樣中(zhōng)的遊離脂(zhī)肪(fáng)酸(suān)，用氫(qīng)氧(yǎng)化鉀標準(zhǔn)滴定(dìng)溶液中(zhōng)和(hé)樣品溶(róng)液中(zhōng)的(dí)脂(zhī)肪(fáng)酸，同時測(cè)定(dìng)滴定過程中樣品溶(róng)液pH的變化，並(bìng)繪(huì)製(zhì)pH-滴定體積(jī)實時變化(huà)曲綫。采(cǎi)用pH預(yù)設終點滴(dī)定(dìng)模式判定滴(dī)定(dìng)終點(diǎn)，終(zhōng)點pH的(dí)設定(dìng)以(yǐ)百裏香(xiāng)酚藍指示劑出現(xiàn)微藍色為(wéi)準，一般為9.15~9.45，當達到預(yù)設終點pH時即(jí)停止(zhǐ)滴(dī)定(dìng)，最(zuì)後(hòu)通(tōng)過測量滴(dī)定(dìng)終(zhōng)點(diǎn)消耗(hào)的標(biāo)準溶液的體(tǐ)積計(jì)算(suàn)脂(zhī)肪酸值(zhí)。

試劑(jì)和(hé)材(cái)料(liào)
無水乙(yǐ)醇(chún)。
95%乙醇。
氫(qīng)氧化鉀(jiǎ)。
百裏(lǐ)香(xiāng)酚藍(lán)，指示劑(jì)。
0.5%百(bǎi)裏(lǐ)香酚藍(lán)指示劑(jì)：稱(chēng)取0.5g百裏(lǐ)香酚藍(lán)，先用(yòng)少(shǎo)量(liáng)95%乙(yǐ)醇(chún)溶(róng)解，再(zài)定(dìng)容(róng)至100mL，密閉(bì)放(fàng)置(zhì)24h後備用(yòng)。
不(bù)含(hán)二氧(yǎng)化碳的(dí)水：將水(shuǐ)煮沸10min左右(yòu)，加蓋(gài)冷卻，密閉存放(fàng)於清(qīng)潔容器(qì)中(zhōng)備用。
0.2mol/L氫氧(yǎng)化(huà)鉀(jiǎ)標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(yè)：按(àn)照 GB/T 601 的要求配製和(hé)標定(dìng)，儲(chǔ)於(yú)聚(jù)乙(yǐ)烯(xī)塑料瓶(píng)中(zhōng)，備用。
0.01mol/L氫(qīng)氧(yǎng)化(huà)鉀標準滴(dī)定溶(róng)液：移(yí)取(qǔ)50.00mL 0.2mol/L氫氧化(huà)鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備溶(róng)液(yè)於1000mL容(róng)量瓶中(zhōng)，用不含(hán)二氧(yǎng)化碳(tàn)的水(shuǐ)稀釋定容(róng)至1000 mL，混合(hé)均匀後(hòu)存(cún)放(fàng)於(yú)聚乙烯塑(sù)料瓶中。
快速(sù)定(dìng)性濾紙(zhǐ)。

儀器(qì)和設(shè)備
自動(dòng)電(diàn)位(wèi)滴(dī)定(dìng)儀：具備自(zì)動pH電(diàn)極校正功能(néng)和pH預(yù)設終點(diǎn)滴定模式(shì)功能(néng)；由微機控(kòng)製(zhì)，能(néng)實(shí)時自動繪製(zhì)和記錄滴定時(shí)的(dí)pH-滴定體(tǐ)積實時變化(huà)曲(qū)綫(xiàn)；滴(dī)定(dìng)精度(dù)應(yīng)達0.01mL/滴，電信(xìn)號測(cè)量精(jīng)度(dù)達(dá)到(dào)0.1mV；配備5mL～20mL的(dí)滴定液(yè)加液(yè)管；滴(dī)定管(guǎn)的出口(kǒu)處(chǔ)配備防擴散頭(tóu)。
水相(xiāng)酸鹼滴(dī)定(dìng)專用(yòng)復合pH電極：每(měi)次試驗前，應使用(yòng)pH為4.0，7.0，9. 0的緩衝(chōng)溶液校正(zhèng)電(diàn)極(jí)，保(bǎo)證電極(jí)狀(zhuàng)態良好，綫性98%～102%。
滴(dī)定杯：100mL玻(bō)璃燒(shāo)杯。
其他：
實(shí)驗礱穀機。
粉碎機：錘式旋(xuán)風(fēng)磨(mó)，具有(yǒu)風門可調節(jié)和(hé)自清理功能，以避免(miǎn)樣品殘(cán)留和出(chū)樣管(guǎn)堵塞(sāi)。在粉碎樣品時，應避免(miǎn)磨膛(táng)發熱。當(dāng)磨膛溫(wēn)度較高(gāo)時(shí)，應暫停粉(fěn)碎，並(bìng)及時(shí)清理(lǐ)出(chū)料管(guǎn)。
電(diàn)動(dòng)粉篩：配(pèi)備CQ16篩層(相(xiāng)當(dāng)於40目篩(shāi)，篩(shāi)網孔徑0.425mm)，符(fú)合 GB/T 5507 的(dí)要求。
天(tiān)平：感量(liáng)為0.01g。
具塞(sāi)磨(mó)口錐形瓶：250mL。
移液(yè)管(guǎn)：50.00mL，50.0mL，25.00mL。
振蕩器：往返式(shì)，振(zhèn)幅為(wéi)20mm，振(zhèn)蕩(dàng)頻率(shuài)為100次/min。
具塞比色管(guǎn)：25mL，50mL。
短頸玻(bō)璃漏鬥。
離心(xīn)機：離心加速度(dù)2000g或4000g。
離(lí)心管：容(róng)量50mL～100mL，配有(yǒu)密(mì)封塞。

分(fēn)析步驟(zhòu)
試樣製(zhì)備(bèi)
稻穀及其他帶(dài)殼的(dí)穀(gǔ)物
取混(hùn)合(hé)均匀的稻穀及(jí)其(qí)他(tā)帶(dài)殼(ké)的穀物(wù)適(shì)量(liáng)，除去礦(kuàng)物質(zhì)及(jí)大型(xíng)雜質，稻穀用(yòng)實驗(yàn)礱穀機脫殼，去淨穀殼，稗粒，癟(biē)穀等，其(qí)他穀物用適(shì)當方法脫殼(ké)，得(dé)到的(dí)淨(jìng)糙(cāo)米(mǐ)或(huò)其他(tā)穀物米(mǐ)按下(xià)麵所述方(fāng)法粉碎(suì)。批(pī)量處理樣品時，應按需(xū)脫(tuō)殼(ké)，脫殼(ké)後(hòu)的(dí)糙(cāo)米(mǐ)或其他穀物(wù)米應當天使用。
米類，不帶殼的稻類，麥(mài)類(lèi)，粗(cū)糧(liáng)類(lèi)穀(gǔ)物及(jí)其(qí)非(fēi)粉類(lèi)製品(pǐn)
取混(hùn)合(hé)均匀的(dí)樣(yàng)品(pǐn)約100g，用粉碎(suì)機碾磨(mó)，碾(niǎn)磨後的(dí)樣品一次(cì)通過電動粉篩的應(yīng)在95%以上(shàng)。粉碎樣品(合並(bìng)篩上，篩下全部樣(yàng)品(pǐn))經充(chōng)分混(hùn)合後裝入(rù)密閉(bì)容器(qì)中備(bèi)用(yòng)。
米(mǐ)粉(fěn)，小(xiǎo)麥粉(fěn)，玉米粉(fěn)及其(qí)他(tā)粗糧(liáng)類(lèi)穀物碾(niǎn)磨粉(fěn)
分(fēn)取試樣(yàng)約(yuē)80g備(bèi)用。
試樣前處理(lǐ)
提(tí)取及靜置時間(jiān)
稻穀等稻類(lèi)穀物及其碾磨(mó)製(zhì)品(pǐn)，振蕩10min，靜置1min～2min；玉(yù)米等粗糧類穀物及(jí)其碾磨(mó)製品(pǐn)，振蕩30min，靜置2min～3min；小麥(mài)等(děng)麥(mài)類穀(gǔ)物(wù)及(jí)其碾(niǎn)磨製(zhì)品(pǐn)，振蕩40min，靜置(zhì)2min～3min。脂肪酸值(zhí)隨提取時(shí)間(jiān)變(biàn)化關係(xì)見(jiàn)附錄A。
提(tí)取方法
稱取(qǔ)製(zhì)備好的(dí)試樣10g(精(jīng)確至0.01g)於具塞磨(mó)口(kǒu)錐(zhuī)形瓶中(zhōng)，加(jiā)入50.0mL無水乙(yǐ)醇，置(zhì)振(zhèn)蕩(dàng)器上(shàng)振(zhèn)蕩，達到規定(dìng)的提取和靜置(zhì)時間(jiān)，在(zài)短(duǎn)頸玻(bō)璃漏(lòu)鬥中放入折疊式快速(sù)定(dìng)性(xìng)濾紙過濾。棄去(qù)最初幾滴濾液，收集(jí)濾液25mL以(yǐ)上作為(wéi)待測液，置(zhì)於25mL具(jù)塞(sāi)比(bǐ)色管(guǎn)中，或(huò)將(jiāng)提取液從(cóng)錐形瓶轉移(yí)至(zhì)離(lí)心管中(zhōng)，用(yòng)2000g離心(xīn)加速(sù)度的離(lí)心機離心5min或用(yòng)4000g離心(xīn)加速度的離心(xīn)機離(lí)心3min，取上(shàng)清(qīng)液作(zuò)為(wéi)待測(cè)液。
試(shì)樣水分(fēn)含量測定(dìng)
用測定脂(zhī)肪酸值(zhí)的同一粉碎(suì)樣品，按 GB/T 5497 測(cè)定(dìng)水(shuǐ)分含(hán)量。
試樣測(cè)定(dìng)
移取25.00mL試(shì)樣提取(qǔ)液於滴定(dìng)杯(bēi)中(zhōng)，加(jiā)入50.0mL水(shuǐ)，滴(dī)加3滴0.5%百(bǎi)裏(lǐ)香酚藍(lán)指(zhǐ)示(shì)劑，用以(yǐ)監測滴(dī)定終(zhōng)點，將(jiāng)已(yǐ)連接(jiē)在自動電位滴定儀(yí)上(shàng)的電(diàn)極和滴(dī)定管插入樣品溶液(yè)中(zhōng)，應將電極的玻(bō)璃泡(pào)和滴定(dìng)管的(dí)防(fáng)擴(kuò)散頭浸(jìn)沒(méi)在(zài)樣(yàng)品(pǐn)溶(róng)液(yè)的液麵以(yǐ)下，且(qiě)不(bù)可與燒杯(bēi)壁，燒杯底(dǐ)部觸碰(pèng)，同(tóng)時打開電極上(shàng)部(bù)的(dí)密(mì)封塞(sāi)。啟動自(zì)動電(diàn)位滴(dī)定儀，用(yòng)0.01mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴(dī)定(dìng)溶液進行(háng)滴(dī)定，到(dào)達預設的(dí)終點(diǎn)pH時，滴定自動停止(zhǐ)，獲得(dé)試(shì)樣(yàng)測(cè)定消(xiāo)耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶(róng)液毫升數(V₁)。
測(cè)定(dìng)時自(zì)動電位滴定(dìng)儀的(dí)參(cān)數條件如(rú)下(xià)：
——滴定(dìng)模(mó)式(shì)：啟用預設終(zhōng)點(diǎn)滴定(dìng)模式控製；
——平衡時(shí)間(jiān)：5s～10s(不(bù)同(tóng)類型的電(diàn)位(wèi)滴定儀(yí)表述(shù)方(fāng)式可能不(bù)同，根(gēn)據(jù)產品(pǐn)說明書設定(dìng))；
——最(zuì)小加液(yè)速度：10μL/min～25μL/min；
——最大(dà)加液速度(dù)：3.0mL/min～5.0mL/min；
——動(dòng)態(tài)範(fàn)圍：2～4(不同類型的電(diàn)位滴定儀表述方式(shì)可能不同(tóng)，根據(jù)產品(pǐn)說明書(shū)設定，以(yǐ)控製終(zhōng)點滴(dī)定的速度和(hé)精(jīng)度)；
——攪拌速度：8～10(不同類(lèi)型(xíng)的電(diàn)位滴(dī)定儀攪拌方(fāng)式(shì)，表(biǎo)述(shù)方式(shì)可(kě)能(néng)不同，根據(jù)產品(pǐn)說明(míng)書(shū)設定(dìng)，以滴定溶液能夠(gòu)攪(jiǎo)拌(bàn)均匀為(wéi)準)；
——停止漂移：20μL/min(不(bù)同(tóng)類(lèi)型(xíng)的電位滴定儀(yí)表述(shù)方式(shì)可能不(bù)同(tóng)，根據(jù)產品(pǐn)說明(míng)書設定(dìng))；
——啟(qǐ)動(dòng)實(shí)時自動(dòng)監控(kòng)功能，由(yóu)微機實(shí)時(shí)自動(dòng)繪(huì)製(zhì)相(xiāng)應的(dí)pH-滴定體積實時(shí)變化曲(qū)綫(xiàn)；
——終(zhōng)點(diǎn)判定方法：選用SET pH模(mó)式滴定，終(zhōng)點(diǎn)pH設(shè)定在9.15～9.45之間。終點(diǎn)pH的(dí)選擇(zé)，以空(kōng)白(bái)滴(dī)定(dìng)為參考，當滴定空白(bái)液(yè)時百裏(lǐ)香酚(fēn)藍指(zhǐ)示劑出(chū)現(xiàn)微(wēi)藍色30s不消(xiāo)失(shī)，以(yǐ)此(cǐ)pH設定為(wéi)終點(diǎn)pH。每(měi)個(gè)樣(yàng)品滴(dī)定(dìng)結束後，電極和(hé)滴(dī)定(dìng)管(guǎn)應用(yòng)水衝洗幹(gān)淨方可(kě)進(jìn)行(háng)下(xià)一(yī)個(gè)樣品的(dí)測(cè)定。
空(kōng)白試(shì)驗
移取(qǔ)25.00mL無水(shuǐ)乙醇(chún)於滴(dī)定杯(bēi)中，加入50.0mL水(shuǐ)，滴(dī)加3滴(dī)0.5%百(bǎi)裏香酚藍指(zhǐ)示(shì)劑，用以(yǐ)監(jiān)測(cè)滴定(dìng)終(zhōng)點(diǎn)，然後按照(zhào)"試樣測定"的(dí)滴定(dìng)方(fāng)法(fǎ)進(jìn)行滴定。獲得空(kōng)白測定(dìng)消耗的標準滴定溶(róng)液(yè)毫升數(V₀)。
滴加指示劑應吸取(qǔ)上清(qīng)液(yè)；在(zài)測定過程中應注意根據滴定溶液(yè)的(dí)終點變色(sè)情況(kuàng)適時(shí)調整參(cān)數(shù)條(tiáo)件， 一(yī)般(bān)以空(kōng)白(bái)液滴定(dìng)百裏香(xiāng)酚藍指示(shì)劑出(chū)現微(wēi)藍色(sè)30s不(bù)消失(shī)，樣液滴(dī)定出現微藍色為(wéi)準。

測定結果的(dí)表(biǎo)達
脂(zhī)肪酸值(zhí)以(yǐ)中(zhōng)和100g幹(gān)物質(zhì)試(shì)樣中遊(yóu)離脂肪酸(suān)所(suǒ)需氫氧化鉀毫(háo)克數表(biǎo)示，按照公(gōng)式(1)計(jì)算：

式中(zhōng)：
S ——試樣(yàng)的脂肪酸值(zhí)，單位(wèi)為(wéi)毫克(kè)每(měi)100克(kè)(mg/100g)；
V₁——滴定試樣液(yè)所耗氫(qīng)氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴(dī)定溶液體積，單(dān)位為毫升(shēng)(mL)；
V₀——滴定(dìng)空白(bái)液所耗(hào)氫氧化鉀標準滴定(dìng)溶液(yè)體(tǐ)積(jī)，單位為(wéi)毫升(shēng)(mL)；
c ——氫氧化(huà)鉀標準滴定溶(róng)液(yè)的濃(nóng)度(dù)，單(dān)位為(wéi)摩爾每升(shēng)(mol/L)；
56.1——氫氧化鉀(jiǎ)摩(mó)爾(ěr)質量(liáng)，單(dān)位為克每(měi)摩爾(g/mol)；
50——試(shì)樣提取(qǔ)用無水乙醇的(dí)體(tǐ)積，單位為毫(háo)升(mL)；
25——用(yòng)於滴定的(dí)試樣(yàng)提取液(yè)的體積(jī)，單(dān)位為毫(háo)升(mL)；
100——換算為100g幹(gān)試樣的(dí)質(zhì)量，單(dān)位為克(g)；
m ——試(shì)樣的質量，單位為克(g)；
ω ——試(shì)樣水分(fēn)質(zhì)量(liáng)分(fēn)數，即(jí)每100g試樣(yàng)中(zhōng)含水分的質(zhì)量，單(dān)位為克(g)。
每份(fèn)試樣取(qǔ)兩個(gè)平行(háng)樣品進(jìn)行(háng)獨(dú)立測定(dìng)，兩(liǎng)個(gè)測定(dìng)結果(guǒ)之(zhī)差的絕(jué)對值(zhí)符合精密度要(yào)求(qiú)時，以(yǐ)其平均值為(wéi)測(cè)定結果(guǒ)；不符合(hé)精(jīng)密度要求時，按 GB/T 5490-2010 中11.2.2的(dí)規定(dìng)處理。計算(suàn)結(jié)果保留(liú)三(sān)位有效(xiào)數字(zì)。

精密度
在重復性(xìng)條(tiáo)件(jiàn)下(xià)獲得(dé)的兩次(cì)獨(dú)立(lì)測定結果(guǒ)的(dí)絕對差(chà)值不(bù)應(yīng)大(dà)於2.0mg/100g。

自動(dòng)光度(dù)滴定儀法(fǎ)
原(yuán)理
在(zài)一(yī)定溫(wēn)度(dù)條(tiáo)件下(xià)，用(yòng)無水(shuǐ)乙醇(chún)提(tí)取(qǔ)試(shì)樣中的(dí)遊離(lí)脂肪(fáng)酸(suān)，以百(bǎi)裏香(xiāng)酚(fēn)藍(lán)作為指示劑(jì)，采(cǎi)用自動(dòng)光度滴定(dìng)儀，用氫氧(yǎng)化鉀標準滴定(dìng)溶液(yè)中和樣(yàng)品溶液(yè)中的遊離脂肪酸(suān)。隨(suí)著(zhuó)溶(róng)液顏色的變化，光學傳感器檢測到透過滴定(dìng)體係溶液(yè)的光(guāng)能量(liáng)變化(huà)，當(dāng)達到滴定(dìng)終點時(shí)滴(dī)定儀自(zì)動(dòng)停止滴定，通(tōng)過測量(liáng)滴(dī)定終點消(xiāo)耗的標(biāo)準溶(róng)液的體積(jī)計算脂肪酸值。

試劑和材(cái)料(liào)
無水乙(yǐ)醇。
95%乙(yǐ)醇。
氫氧化(huà)鉀。
百裏(lǐ)香酚藍，指示劑。
0.02g/L百裏(lǐ)香(xiāng)酚藍指(zhǐ)示劑：稱取(qǔ)0.02g百(bǎi)裏香酚藍，先(xiān)用少量(liáng)95%乙醇溶解，再(zài)用95%乙醇定容至1000mL，混匀，儲於(yú)試(shì)劑(jì)瓶(píng)中，密閉放置24h後(hòu)備(bèi)用。
中性乙(yǐ)醇：量(liáng)取20mL 95%乙(yǐ)醇，滴加(jiā)0.5%百(bǎi)裏(lǐ)香(xiāng)酚(fēn)藍(lán)指(zhǐ)示劑3滴，用(yòng)0.01mol/L氫(qīng)氧化(huà)鉀標準(zhǔn)滴定溶(róng)液(yè)滴定至微(wēi)藍(lán)色(sè)，以30s不褪(tuì)色(sè)為終點(diǎn)，記(jì)下所(suǒ)耗氫(qīng)氧化鉀(jiǎ)標準滴(dī)定(dìng)溶液(yè)的毫升(shēng)數(shù)(V_a)；量(liáng)取1000mL 95%乙(yǐ)醇，準(zhǔn)確加入V_b(V_b=50×V_a)氫氧化鉀(jiǎ)標準滴(dī)定溶液，混合(hé)均匀(yún)備用。
0.01mol/L氫(qīng)氧(yǎng)化鉀(jiǎ)標準滴定溶液(yè)：準(zhǔn)確移取50.00mL 0.2mol/L氫(qīng)氧化鉀標(biāo)準儲(chǔ)備(bèi)液於1000mL容(róng)量(liáng)瓶(píng)中，用(yòng)中性(xìng)乙醇稀(xī)釋(shì)定(dìng)容(róng)至1000mL，混合均匀後存放於聚乙烯塑料(liào)瓶(píng)中。臨用前現配(pèi)。
中速(sù)定量濾紙。
快(kuài)速定(dìng)性濾紙(zhǐ)。

儀器和設備(bèi)
自(zì)動光(guāng)度滴定儀(yí)：具(jù)備(bèi)磁力(lì)攪(jiǎo)拌功能，自動(dòng)滴(dī)定(dìng)功能(néng)，自(zì)動(dòng)判(pàn)定滴(dī)定終(zhōng)點(diǎn)並(bìng)自(zì)動停止功(gōng)能，自(zì)動計(jì)量計(jì)算功能(néng)。定量(liáng)滴定泵(bèng)最小加(jiā)液量(liáng)≤0.01mL，流量(liáng)精度：相對標準偏(piān)差(chà)(RSD)≤1%；滴定速度0.5mL/min～10mL/min範圍內可調，相(xiāng)對偏差(chà)≤±1%；攪(jiǎo)拌機攪(jiǎo)拌速(sù)度(dù)10r/min～250r/min範圍內可調。
磁力(lì)攪(jiǎo)拌器：攪拌(bàn)速(sù)度1200r/min。
滴(dī)定杯(bēi)：100mL石(shí)英杯。
其他：
實驗礱(lóng)穀(gǔ)機。
粉(fěn)碎(suì)機(jī)：錘(chuí)式旋(xuán)風(fēng)磨，具有風(fēng)門可(kě)調(tiáo)節(jié)和自(zì)清理(lǐ)功(gōng)能，以避(bì)免樣品殘(cán)留(liú)和(hé)出樣管(guǎn)堵(dǔ)塞。在粉碎樣品(pǐn)時，應(yīng)避(bì)免磨膛發熱。當(dāng)磨(mó)膛溫度(dù)較高時，應暫停粉碎(suì)，並及時清(qīng)理出(chū)料管(guǎn)。
電(diàn)動粉(fěn)篩：配備CQ16篩層(céng)(相當於40目(mù)篩(shāi)，篩網(wǎng)孔徑0.425mm)，符合 GB/T 5507 的要求(qiú)。
天平(píng)：感量為(wéi)0.01g。
具塞(sāi)磨口錐(zhuī)形瓶(píng)：250mL。
移(yí)液(yè)管：50.00mL，50.0mL，25.00mL。
振(zhèn)蕩器：往返式，振(zhèn)幅(fú)為(wéi)20mm，振蕩頻率(shuài)為100次/min。
具塞比(bǐ)色管：25mL，50mL。
短頸玻璃漏(lòu)鬥。
離(lí)心(xīn)機：離(lí)心加速度2000g或4000g。
離心管(guǎn)：容量50mL～100mL，配有密封(fēng)塞(sāi)。

分析(xī)步驟
試樣製(zhì)備(bèi)
稻穀及(jí)其他帶(dài)殼的穀(gǔ)物
取(qǔ)混合均(jūn)匀的(dí)稻穀及(jí)其他(tā)帶殼的穀(gǔ)物適(shì)量，除(chú)去(qù)礦物質及(jí)大型雜質，稻(dào)穀用實驗(yàn)礱穀機脫(tuō)殼(ké)，去(qù)淨穀殼(ké)，稗粒，癟(biē)穀等，其他穀物用(yòng)適(shì)當方法脫(tuō)殼(ké)，得(dé)到的淨糙米或其他穀物(wù)米按(àn)下麵所述方(fāng)法粉碎。批(pī)量(liáng)處理樣品(pǐn)時(shí)，應按需脫(tuō)殼，脫殼後(hòu)的糙米(mǐ)或(huò)其他穀物米(mǐ)應(yīng)當(dāng)天(tiān)使用。
米類，不帶殼的稻(dào)類(lèi)，麥(mài)類，粗(cū)糧(liáng)類穀物及其非(fēi)粉類製品
取(qǔ)混合均(jūn)匀(yún)的樣品(pǐn)約100g，用粉(fěn)碎(suì)機碾(niǎn)磨(mó)，碾(niǎn)磨後的樣(yàng)品一次(cì)通過電動粉篩的應在(zài)95%以(yǐ)上。粉碎(suì)樣品(合並篩上(shàng)，篩下(xià)全(quán)部樣品)經(jīng)充(chōng)分混合後(hòu)裝入(rù)密(mì)閉容器中(zhōng)備用(yòng)。
米粉，小麥粉(fěn)，玉米(mǐ)粉及(jí)其(qí)他(tā)粗糧(liáng)類穀物(wù)碾磨(mó)粉(fěn)
分取(qǔ)試樣(yàng)約80g備用(yòng)。
試樣前處理(lǐ)
方法一(yī)：提取(qǔ)及(jí)靜(jìng)置(zhì)時間
稻(dào)穀等(děng)稻(dào)類(lèi)穀(gǔ)物(wù)及(jí)其(qí)碾磨製(zhì)品，振蕩10min，靜(jìng)置1min～2min；玉米等(děng)粗(cū)糧類(lèi)穀物及其碾磨製品，振(zhèn)蕩30min，靜置2min～3min；小(xiǎo)麥等(děng)麥類(lèi)穀物及其(qí)碾磨製(zhì)品，振蕩40min，靜(jìng)置(zhì)2min～3min。脂肪酸值隨提取(qǔ)時間變化(huà)關係見(jiàn)附錄A。
提(tí)取方法(fǎ)
稱(chēng)取製備好(hǎo)的試樣10g(精(jīng)確(què)至(zhì)0.01g)於具(jù)塞(sāi)磨(mó)口錐(zhuī)形瓶中(zhōng)，加入(rù)50.0mL無(wú)水乙醇，置(zhì)振蕩(dàng)器上振蕩，達到規定(dìng)的(dí)提(tí)取和靜置(zhì)時間，在(zài)短(duǎn)頸玻璃(lí)漏(lòu)鬥中放入折疊(dié)式快(kuài)速定性(xìng)濾(lǜ)紙(zhǐ)過(guò)濾(lǜ)。棄去最初幾滴(dī)濾液，收集(jí)濾(lǜ)液25mL以上作為待(dài)測液，置於25mL具塞比色(sè)管(guǎn)中，或(huò)將提取液從錐形瓶(píng)轉(zhuǎn)移至離(lí)心管(guǎn)中，用(yòng)2000g離心加速(sù)度(dù)的離(lí)心(xīn)機離(lí)心5min或(huò)用4000g離心加(jiā)速度(dù)的(dí)離(lí)心(xīn)機離(lí)心3min，取上(shàng)清液(yè)作(zuò)為待測液。
方法二：稱(chēng)取(qǔ)製備(bèi)好的試(shì)樣(yàng)10g(精(jīng)確(què)至0.01g)於100mL離(lí)心管(guǎn)中，加入(rù)50.0mL無水(shuǐ)乙醇，置(zhì)磁(cí)力攪(jiǎo)拌(bàn)器上(shàng)攪(jiǎo)拌(bàn)，稻(dào)穀等稻類(lèi)穀(gǔ)物及其(qí)碾磨(mó)製品攪(jiǎo)拌8min，靜(jìng)置1min~2min；玉米等(děng)粗糧類(lèi)穀物及(jí)其碾磨製品攪拌25min，靜置2min～3min；小麥等(děng)麥類穀物及(jí)其(qí)碾磨製(zhì)品(pǐn)攪拌(bàn)30min；靜置2min～3min，通(tōng)過中速定(dìng)量濾(lǜ)紙將樣(yàng)液(yè)抽濾至滴定(dìng)儀(yí)樣(yàng)液接收瓶中(zhōng)。
試(shì)樣水(shuǐ)分(fēn)含量測定(dìng)
用(yòng)測定脂(zhī)肪酸(suān)值(zhí)的同一(yī)粉碎(suì)樣(yàng)品，按(àn) GB/T 5497 測(cè)定(dìng)水(shuǐ)分含量。
試(shì)樣測定
滴(dī)定(dìng)杯(bēi)中(zhōng)放入磁(cí)力(lì)攪拌子(zǐ)，移取(qǔ)25.00mL試樣提取液(yè)於該(gāi)滴定杯(bēi)中(zhōng)，加(jiā)入25.0mL 0.02g/L百裏香酚(fēn)藍指(zhǐ)示(shì)劑，將(jiāng)滴(dī)定杯放置於測量(liáng)池，啟動(dòng)自(zì)動光度滴定儀，滴(dī)定儀自(zì)動(dòng)以0.01mol/L氫氧(yǎng)化鉀標(biāo)準滴(dī)定(dìng)溶(róng)液開(kāi)始滴定(dìng)，以滴定液的顏(yán)色變化判(pàn)定終(zhōng)點。當到達滴(dī)定終點時滴(dī)定(dìng)儀(yí)自動停止滴定，獲得試樣測(cè)定消(xiāo)耗(hào)的標(biāo)準滴定(dìng)溶液(yè)毫升數(V₁)。
測定(dìng)時滴定儀(yí)的參數(shù)條(tiáo)件如下(xià)：
——最大滴定(dìng)速(sù)度：5mL/min；
——最小(xiǎo)滴定(dìng)速(sù)度(dù)：1mL/min；
——攪拌速(sù)度：200r/min左右(yòu)(以能(néng)迅速把(bǎ)溶液攪(jiǎo)拌均(jūn)匀(yún)為準(zhǔn))。
空(kōng)白試驗
移取25.00mL無水乙醇於放(fàng)有磁力(lì)攪拌(bàn)子的滴(dī)定杯(bēi)中，按以上(shàng)操(cāo)作，獲(huò)得(dé)空(kōng)白消(xiāo)耗(hào)的(dí)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶(róng)液毫(háo)升(shēng)數(V₀)。
光(guāng)度(dù)滴(dī)定儀(yí)應具備內置(zhì)校正功能(néng)，以(yǐ)校(xiào)正因滴定體係(xì)的不同(tóng)帶(dài)來(lái)的脂肪酸(suān)值測定差異(yì)，並與第(dì)一(yī)法(fǎ)測定(dìng)結果比較無顯著性(xìng)差異(yì)，方(fāng)可使(shǐ)用(yòng)；如(rú)果(guǒ)滴定儀自(zì)動定量轉移(yí)濾液，則應具(jù)備(bèi)管(guǎn)路及容(róng)器(qì)清洗功能，轉(zhuǎn)移體積校正功能(néng)，確保(bǎo)器具清(qīng)潔(jié)，轉移(yí)體(tǐ)積準(zhǔn)確。

測定結果的表(biǎo)達(dá)
脂肪酸值(zhí)以中和(hé)100g幹(gān)物(wù)質(zhì)試(shì)樣中(zhōng)遊(yóu)離脂(zhī)肪酸所需(xū)氫氧化鉀毫克(kè)數表示，按照公(gōng)式(1)計(jì)算：

式(shì)中(zhōng)：
S ——試樣(yàng)的(dí)脂(zhī)肪酸(suān)值，單位(wèi)為毫克每(měi)100克(mg/100g)；
V₁——滴(dī)定試(shì)樣(yàng)液(yè)所耗(hào)氫氧化鉀(jiǎ)標準滴定溶(róng)液體(tǐ)積，單(dān)位(wèi)為(wéi)毫(háo)升(shēng)(mL)；
V₀——滴定空白液(yè)所耗氫(qīng)氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴(dī)定溶(róng)液體積，單(dān)位為毫升(mL)；
c ——氫氧化(huà)鉀標準滴(dī)定溶液(yè)的(dí)濃(nóng)度，單位為(wéi)摩爾每升(mol/L)；
56.1——氫氧化鉀摩(mó)爾質量，單位為(wéi)克每摩(mó)爾(g/mol)；
50——試樣提取用無(wú)水(shuǐ)乙醇(chún)的體(tǐ)積(jī)，單(dān)位為毫(háo)升(mL)；
25——用於(yú)滴(dī)定的(dí)試樣提取液(yè)的(dí)體積，單位為毫升(shēng)(mL)；
100——換(huàn)算為(wéi)100g幹試(shì)樣的(dí)質(zhì)量，單位為(wéi)克(kè)(g)；
m ——試(shì)樣(yàng)的(dí)質(zhì)量，單位為克(g)；
ω ——試樣(yàng)水(shuǐ)分(fēn)質(zhì)量分數(shù)，即(jí)每100g試樣(yàng)中(zhōng)含水分的(dí)質(zhì)量(liáng)，單位為(wéi)克(g)。
每(měi)份(fèn)試(shì)樣取兩(liǎng)個(gè)平(píng)行(háng)樣(yàng)品進行獨立(lì)測定，兩(liǎng)個測定(dìng)結果(guǒ)之(zhī)差的絕(jué)對值(zhí)符合精密度要求(qiú)時，以其平(píng)均(jūn)值(zhí)為(wéi)測(cè)定結果；不符合精密(mì)度要(yào)求時(shí)，按 GB/T 5490-2010 中11.2.2的規定處理(lǐ)。計(jì)算(suàn)結(jié)果保留(liú)三(sān)位有效(xiào)數字(zì)。

精密度
在重(zhòng)復(fù)性條(tiáo)件下(xià)獲(huò)得(dé)的(dí)兩次獨立測定結(jié)果(guǒ)的絕(jué)對差值不(bù)應(yīng)大於(yú)2.0mg/100g。

自動(dòng)圖像分析(xī)滴(dī)定(dìng)儀(yí)法(fǎ)
原理(lǐ)
在一(yī)定溫度條(tiáo)件(jiàn)下(xià)，用(yòng)無(wú)水(shuǐ)乙醇(chún)提(tí)取試(shì)樣中的遊離脂肪(fáng)酸，以(yǐ)百(bǎi)裏香酚(fēn)藍為指(zhǐ)示劑(jì)，通(tōng)過自(zì)動圖(tú)像(xiàng)分析滴(dī)定儀用氫(qīng)氧化鉀標準(zhǔn)滴(dī)定溶液中和樣品溶(róng)液中的(dí)遊離(lí)脂肪酸。自(zì)動(dòng)圖像(xiàng)分析(xī)滴定儀采用(yòng)圖(tú)像分析比(bǐ)較(jiào)方法(fǎ)實時(shí)監(jiān)測(cè)溶液(yè)顏色變化(huà)，當滴定(dìng)達到終點(diǎn)顏色(sè)時滴(dī)定儀(yí)自(zì)動停止(zhǐ)滴定(dìng)，通過滴定終點(diǎn)消(xiāo)耗(hào)的(dí)標準溶液的體積(jī)計(jì)算樣品的(dí)脂肪酸值(zhí)。