GB/T 29661-2013 化妝(zhuāng)品中(zhōng)尿素(sù)含量的測(cè)定 酶(méi)催化法

範圍(wéi)
本標(biāo)準(zhǔn)規定了化(huà)妝品中(zhōng)尿素(sù)含量的測(cè)定方法——酶催化法(fǎ)。
本標(biāo)準適(shì)用於(yú)化妝(zhuāng)品(pǐn)中尿素(sù)的定(dìng)量(liáng)測(cè)定，其定(dìng)量下限(xiàn)為0.025%。

原(yuán)理
樣品在偏(piān)酸性條件(jiàn)下(xià)，所含(hán)尿素被(bèi)尿素酶(méi)分解為銨(ǎn)鹽，用酸(suān)滴(dī)定，由(yóu)此(cǐ)計(jì)算(suàn)尿素含量。

試劑和材(cái)料
除另 有(yǒu)規定外(wài)，試劑均(jūn)為分(fēn)析(xī)純。水為 GB/T 6682 規定的(dí)三(sān)級水(shuǐ)。
尿(niào)素(sù)酶: 0.5g以下可將(jiāng)0.25 g尿素於40°C~45°C在1h內*分解。按照(zhào)產(chǎn)品說(shuō)明保(bǎo)存。
0.1mol/L鹽酸: 配製(zhì)方(fāng)法按 GB/T 601。
0.1mol/L NaOH溶液: 稱取(qǔ)0.40g NaOH固(gù)體(tǐ)，溶於(yú)100mL水(shuǐ)中(zhōng)。
無(wú)水乙醇。
塑(sù)料薄膜。

儀器(qì)和設(shè)備
高型(xíng)燒杯，100mL。
酸(suān)式(shì)滴定管。
超(chāo)聲波清洗儀(yí)。
磁力(lì)攪拌器(qì)。
pH計(jì): 精度(dù)0.01。
分析(xī)天平(píng): 感量0.01g。
恒溫水(shuǐ)浴鍋(guō)。

分析步驟(zhòu)
試(shì)樣(yàng)製(zhì)備
水劑類(lèi)，乳(rǔ)液類，膏霜類(O/W)樣品(pǐn)
稱取均匀(yún)樣品(pǐn)0.5g(精(jīng)確至0.01g)於高(gāo)型燒(shāo)杯中，加入50mL水，用塑(sù)料薄膜封(fēng)口，超聲提取20min。
將高型燒(shāo)杯放(fàng)在磁力攪(jiǎo)拌器上，邊攪(jiǎo)拌邊滴(dī)加鹽(yán)酸中(zhōng)和至(zhì)pH4.0(用(yòng)pH計, 不(bù)計量, 若溶液(yè)呈pH<4.0，則(zé)需(xū)滴加NaOH溶(róng)液(yè)到pH>4.0，再用(yòng)鹽(yán)酸中和至pH4.0，加入0.2g粉碎較細的(dí)尿素(sù)酶立即用塑(sù)料(liào)薄膜(mó)封口，置(zhì)於 50°C水(shuǐ)浴(yù)中不時的(dí)搖(yáo)晃(huǎng)，30min後(hòu)取(qǔ)出(chū)冷卻(què)至室溫(wēn)，邊(biān)攪拌邊用0.1mol/L的鹽酸滴(dī)定(dìng)至pH4.0，記錄消耗(hào)的0.1mol/L鹽酸(suān)標準(zhǔn)溶(róng)液的體積(jī)V₁。同時(shí)做(zuò)一空白試驗，記(jì)錄(lù)消耗的0.1mol/L鹽(yán)酸(suān)標準(zhǔn)溶(róng)液(yè)的體(tǐ)積V₀。
膏(gāo)霜類(W/O)，油(yóu)溶(róng)性樣品
稱(chēng)取均(jūn)匀樣(yàng)品0.5g(精(jīng)確(què)至0.01g)於15mL離(lí)心(xīn)管中，加(jiā)10mL無(wú)水乙(yǐ) 醇，超聲提取(qǔ)20min。以(yǐ)不低於5000r/min離心(xīn)15min，將(jiāng)上(shàng)清液(yè)全(quán)部(bù)轉(zhuǎn)移(yí)至高型燒(shāo)杯(bēi)中，再加入(rù)40mL水(shuǐ)，搖(yáo)匀。
餘(yú)下步驟與"水(shuǐ)劑類，乳液類(lèi)，膏霜類(lèi)(O/W)樣品"相(xiāng)同(tóng)。
唇膏類(lèi)樣(yàng)品
稱取均匀樣品0.5g(精確至(zhì)0.01g)於15mL離(lí)心(xīn)管中(zhōng)，加(jiā)10mL無水乙醇，在80°C水浴(yù)中(zhōng)加熱3min~5min使唇膏融(róng)化(huà)，渦旋1min，超聲提(tí)取20min。以不(bù)低(dī)於5000r/min離心15min，將(jiāng)上清液(yè)全部轉移至(zhì)高(gāo)型燒(shāo)杯(bēi)中，再加入40mL水，搖(yáo)匀(yún)。
餘下步驟與"水劑類(lèi)，乳(rǔ)液(yè)類(lèi)，膏(gāo)霜(shuāng)類(O/W)樣品(pǐn)"相(xiāng)同(tóng)。
平(píng)行(háng)試(shì)驗
按(àn)上述(shù)步(bù)驟，對(duì)同一樣(yàng)品進行平(píng)行實驗測定。

結果計(jì)算(suàn)算
按(àn)式(1)計(jì)尿素含量，以(yǐ)%表示:

式中(zhōng):
60.06 ——尿素的(dí)相對分(fēn)子質(zhì)量；
V₁ ——樣品消(xiāo)耗0.1mol/L鹽酸標(biāo)準溶液的體積，單位為毫(háo)升(shēng)(mL)；
V₀ ——空白(bái)試驗消(xiāo)耗0.1mol/L鹽酸(suān)標(biāo)準(zhǔn)溶液的體(tǐ)積(jī)，單(dān)位(wèi)為毫升(mL)；
c   ——0.1mol/L鹽酸(suān)標準(zhǔn)溶液(yè)的(dí)濃(nóng)度，單位(wèi)為摩爾(ěr)每升(shēng)(mol/L)；
m  ——試驗樣品質量，單位為(wéi)克(kè)(g)。
計算結果(guǒ)保留(liú)至(zhì)小(xiǎo)數點後1位(wèi)。
注(zhù): 若檢(jiǎn)測尿素(sù)含量超(chāo)過20%，需要(yào)以(yǐ)減(jiǎn)少樣(yàng)品稱(chēng)樣量的(dí)方式重新(xīn)進行(háng)測定。